2014届高考生物一轮复习选修①第二讲微生物的培养与应用课时跟踪检测
(限时：20分钟　满分：60分)
一、选择题(每小题6分，共30分)
1．关于灭菌和消毒的理解不正确的是(　　)
A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质是相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等
解析：灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
答案：A
2．(2014•揭阳模拟)下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是(　　)
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法
C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法而一般不用活菌计数；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30～300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源。
答案：A
3．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)
①加尿素　②不加尿素　③加琼脂糖　④不加琼脂糖
⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦　　　　　　　　B．②④⑥⑧
C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦
解析：分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。
答案：C
4．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(　　)
①可以用相同的培养基
②都需要使用接种针进行接种
③都需要在火焰旁进行接种
④都可以用来计数活菌
A．①②B．③④
C．①③D．②④
解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基；平板划线法一般用于分离而不是计数。
答案：C
5．下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是(　　)

A．只在操作前将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析：操作的前后都要对接种环进行灭菌。划线操作须在火焰旁进行，而不是火焰上；所有的划线区都有可能得到所需菌落，只是5区相对较纯。
答案：D
二、非选择题(共30分)
6．(10分)(2014•东城模拟)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。
(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。
(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。
(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够____________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。
解析：(1)因为后面要进行涂布，所以应该用液体培养基来培养。(2)减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就应只以淀粉为碳源。倒置可以减少培养基受污染，为排除其他因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作对照组。(3)淀粉被水解，培养基会出现透明圈的现象。用平板划线法来培养，可进一步纯化菌种。
答案：(1)液体
(2)系列稀释(或“梯度稀释”)　淀粉　倒置　未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)
(3)出现透明圈　分泌淀粉酶使淀粉发生水解　平板划线
7．(10分)请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；它的同化作用类型是________。
(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4P显色剂琼脂
含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL根据用途划分该培养基属于________培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是________。
(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行____________。
(4)现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL水样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为________。
(5)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(双选)。
A．制作果酒B．由果酒制作果醋
C．制作泡菜D．制作腐乳
(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入________。
解析：(1)大肠杆菌不能制造有机物必须以现成的有机物来合成组成自身的物质，属于异养型生物，在生态系统中主要分解有机物，属于分解者。
(2)根据表中培养基的组成可看出，该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖(蛋白胨)，由于在培养基中添加了显色剂，可判断此培养基为鉴别培养基。
(3)培养大肠杆菌等微生物时，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌。
(4)根据公式计算：每升原水样中大肠杆菌数＝(55＋56＋57)÷3÷0.1×103×103＝5.6×108。
(5)制作果酒用到的微生物是酵母菌是真核生物，制作果醋和制作泡菜用的微生物分别是醋酸菌和乳酸菌，二者都是原核生物，制作腐乳用到的微生物是霉菌，属于真核生物，而大肠杆菌属于原核生物。
(6)植物组织培养与微生物培养明显不同的就是，组织培养的培养基中还需要加入植物激素，主要是生长素和细胞分裂素，作用是诱导根、芽的分化。
答案：(1)分解者　异养型　(2)鉴别　乳糖、蔗糖(蛋白胨)　(3)稀释涂布平板法　灭菌　(4)5.6×108　(5)B、C　(6)植物激素(或生长素和细胞分裂素)
8．(10分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种培养及菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。
解析：(1)蛋白胨中含有N元素，为细菌培养提供氮源和碳源，淀粉只能提供碳源。(2)培养基采用高压蒸汽法进行灭菌。(3)略。(4)不同微生物形成的菌落不同，有多种菌落即有多种细菌；污染程度越重，菌落总数越多。(5)耐盐细菌可以在高浓度NaCl培养基中生存。
答案：(1)氮源(碳源不作要求)　碳源　无机盐　水
(2)高压蒸汽灭菌　(3)恒温培养箱　无菌水　(4)多　高(5)盐(或NaCl)　选择培养基

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